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    CRISPR/Cas9基因敲除敲入
    shRNA/sgRNA載體構建,活性篩選
    siRNA合成/ASO/Gapmer合成
    miRNA
    mRNA合成、sgRNA合成
    蛋白表達分子細胞實驗/新冠
    病毒包裝
    質粒及載體構建
    轉染試劑 Rfector/Cellopener
    細胞永生化
    優勢服務

    cas9 mRNA合成,sgRNA合成,cas9蛋白,Cas12a蛋白,Cas12b蛋白,Cas13a蛋白,Cas14a1蛋白

    提供10ug,15ug,20ug等不同規格體外轉錄cas9 mRNA合成, sgRNA合成,cas9蛋白,cas12a(cpf1),Cas12b蛋白,Cas13a蛋白,Cas14a1蛋白。受精卵直接注射,安全性更高,效果更好,已由不同實驗室驗證!

    建議cas9 mRNA注射濃度100---300 ng/uL,sgRNA 50---100 ng/uL

     

    貨號 名稱 價格 備注
    JYSJ-013 anti-cas9 1750元/20微升  
    JYSJ-015 cas9 mRNA 2000元/10微克 用于原核注射和轉染
    JYSJ-015 cas9 mRNA 3500元/20微克 用于原核注射和轉染
    JYSJ-016 sgRNA 2000元/10微克 用于原核注射和轉染
    JYSJ-016 sgRNA 3800元/20微克 用于原核注射和轉染
    JYSJ-017 cas9蛋白 2000元/10微克 用于RNP原核注射,體外活性檢測,電轉
    JYSJ-01701 Cas12a(cpf1)蛋白 詢價  
    JYSJ-01702 Cas13a蛋白 詢價  
    JYSJ-01703 Cas14a1蛋白 詢價  

    更對規格請咨詢

     

    提供crRNA、tracrRNA 設計合成及修飾, Cas9-GFP融合蛋白表達。

     

     

    體外轉錄試劑盒  (聯系我們獲取產品資料)

    一、cas9 體外轉錄試劑盒

    二、cas9 mRNA純化試劑盒

    三、sgRNA體外轉錄試劑盒

    JY-g001   SgRNAscriptTM  體外轉錄試劑盒          25次  

    四、gRNA純化試劑盒

    JY-g002  pureRNA TM 純化試劑盒   30次

    mMESSAGE mMACHINE® Kit

     

      High Yield Capped RNA Transcription Kit

     

    Data from GeneBio , mRNA for injection & transfection

     

     理:

    轉錄試劑盒是專門設計用于體外高產量合成帽狀RNA(即合成RNA的5端帶帽狀結構),帽狀RNA模擬了大多數真核生物體內發現的mRNA結構。試劑盒內的帽狀類似物[m7G(5)ppp(5)G]與4種核苷酸混合在單一溶液內,簡化了反應步驟。另外帽狀類似物:GTP經優化設計為1:4,最大化轉錄生成RNA和帽狀RNA所占比例。20ul的反應體系加入1µg DNA模板在2h內可以體外合成15-35 µg 7-甲基鳥苷帽狀RNA,其產量是傳統體外轉錄反應的10-50倍。

     勢:

    1)一步法直接合成帶帽狀結構的RNA,其結構與大多數真核生物體內的mRNA結構相同;

    2)試劑盒內酶混合液含RNase抑制劑,保護RNA不被降解;

    3)試劑盒含對照模板( Xenopus elongation factor 1a, pTRI Xef),以檢測試劑盒的轉錄效率;

     用:

    帽狀RNA可直接用于下游實驗:顯微注射入卵母細胞,體外翻譯,轉染或者其他。

    試劑盒成分:(25 reactions

    1.75 ml, Nuclease-free Water。

    50 μL Enzyme Mix (SP6, T7, or T3),50%甘油緩沖液含RNA聚合酶、Rnase抑制劑和其他。

    50 μL,10X Reaction Buffer (SP6, T7, or T3) ,含鹽類、緩沖液、DTT和其他成分。

    250μL,2X NTP/CAP (SP6, T7, or T3),一種中性緩沖液含有ATP/CTP/UTP/GTP/帽狀類似物。

    100μL GTP,20 mM in SP6 Kits; 30 mM in T3 and T7 Kits。

    100 μL,TURBO DNase (2 U/μL)。

    10 μL,pTRI-Xef, 0.5 mg/mL (Control Template)。

    1 ml,Ammonium Acetate Stop Solution。

    1.4 mL,Lithium Chloride Precipitation Solution。

    1.4 mL,Gel Loading Buffer II。

    實驗材料(自行準備):

    DNA模板:待轉錄的DNA序列上游必須帶有正確的RNA聚合酶啟動位點(T7,T3或SP6);

    標記核苷酸(選擇性):[α-32P] UTP or [α-32P]CTP可加入反應體系用作追蹤元素,方便定量檢測RNA合成量;

    合成RNA純化試劑(選擇性):緩沖液或飽和酚/氯仿,異丙醇,離心柱;

    DNA模板(注意事項):

    (1)試劑盒選擇:根據帶轉錄的DNA序列上游帶有的RNA聚合酶啟動位點(T7,T3或SP6)選擇對應的試劑盒;

    (2)模板濃度:推薦使用0.5 μg/μL水溶液或TE溶液;

    (3)模板大?。鹤罴验L度是0.3-5.0kb,可用于更長或更短的模板,需適當調整反應條件;

    (4)模板方向:若合成sense RNA(正義RNA),使用RNA聚合酶對應的細菌啟動子在5端或者蛋白質編碼區的N末端;如果模板含有質粒,經多克隆位點內切酶線性化后啟動子處于相反位置;若合成antisense RNA(反義RNA),使用RNA聚合酶對應的細菌啟動子在3或者蛋白質編碼區的C末端;

    產品信息:現貨供應!

     

    Aziz RB and Soreq H (1990) Improving poor in vitro transcription from GC-rich genes. Nucl. Acids Res18: 3418.參考文獻:

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    Krieg PA (1990) Improved Synthesis of Full-Length RNA Probes at Reduced Incubation Temperatures. Nucl. Acids Res. 18: 6463.

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    Mullis KB, and Faloona F (1987) Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase catalyzed chain reaction. Meth. Enzymol. 155: 335–350.

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    Stoflet ES, Koeberl DD, Sarkar G, and Sommer SS (1988) Genomic amplification with transcript sequencing. Science 239: 491–494.

     

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